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国自然标书中关键技术总结在下面文章中艾德思小编已经为您做了详细的介绍,想要知道这些知识的您也可以认真的做一些参考,毕竟在写国自然标书的时候如果可以针对该问题有了提前的认识,那么也会让自己的标书写得会精彩一些,现在请跟着小编一起阅读文章中这些介绍吧。
国自然标书中关键技术总结
研究方案中“关键实验技术(手段)”的系统性学习和理解,将极大提升你对研究方案的把控能力和设计能力,运筹帷幄,决胜千里,以不变应万变。
例如你知道WB的实验目的是什么吗?难道只是检测表达水平?那么WB能定量计算蛋白丰度吗?如果能那为何又有ELISA这种技术?
技术之间有互补性
因此技术之间,是相互互补的,又不可替代,这需要进一步地理解和学习。
理解关键实验技术(手段)的原理特点和实验目的,和可能的实验结论,有助于研究方案的创新和优化。
1.检测RNA分子在组织和细胞空间分布和表达丰度的技术:活细胞动态RNA成像技术、单分子RNA FISH原位杂交、多分子RNA Scope原位杂交技术、细胞核-细胞质分离结合qPCR、单细胞测序技术、空间转录组技术、Northern blot、dot blot等等;
2.检测蛋白分子的空间分布和表达丰度的技术:免疫荧光、免疫组化、细胞核-细胞质分离结合WB、GFP标签融合蛋白示踪技术、空间蛋白质组学等等;
3.检测DNA拷贝数、突变与否的技术:FISH原位杂交、qPCR、基因组测序等等。
4.检测某蛋白分子总的表达量(不含空间信息):ELISA技术(定量)、western blot技术(半定量,不准确);
5.检测某蛋白分子的分子量大小(不含空间信息):分子筛层析法、western blot技术、双向2D电泳、质谱分析等等;
6.检测某蛋白分子的高级结构信息:蛋白结晶后冷冻电镜解析高级结构、分子对接分析等等;
7.分子表达干预技术:分子克隆操纵表达技术、病毒载体过表达或者敲减表达(shRNA、siRNA)、点突变技术、CRISPR敲除或者敲入技术、CRISPRi沉默技术、功能区分段(truncate)敲除技术、靶蛋白小分子抑制剂或者单抗抑制剂等等;
8.体内水平探索分子功能:类器官、PDX模型、裸鼠皮下成瘤、各种XXX疾病动物模型、活体成像技术等;
9.细胞功能探索:细胞增殖、细胞周期检测、细胞衰老、细胞干性、细胞分化、细胞凋亡、细胞焦亡、炎症风暴、迁移、侵袭能力,表面受体表达等等;亚细胞结构的囊泡和细胞器的分离和电镜影像学观察;
10.分子间互作实验方法:RNA、DNA、蛋白之间的互作分析技术
11.新疾病分子、通路的寻找:蛋白质组学、代谢组学、全转录组测序、生物信息学分析等等;
关键技术上,也要量力而为,一定要符合本单位的硬件技术设施定位,且不可为了新而新,写一些天马行空,脱离实际的技术手段上去,评审专家也会提出质疑。
国自然标书中关键技术总结,是否在上面文章中您也已经阅读了,是否现在的您针对这些问题已经有了很好认识呢,其实在写国自然标书的时候,虽然有很多问题需要我们注意,但是只要可以认真对待,只要我们针对每一个问题耐心的寻找答案,那么对自己就是有好处的。
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